核酸檢測(cè)軟件開發(fā)流程(核酸檢測(cè)軟件開發(fā)流程圖)
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核酸檢測(cè)流程是什么?
1、核酸提取使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動(dòng)化儀器等商品化試劑或設(shè)備并按說明書操作。提取RNA時(shí)應(yīng)注意防止RNA降解。DNA應(yīng)置于-20℃保存,RNA和需長(zhǎng)期保存的DNA應(yīng)置于-80℃保存。
2、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成反應(yīng)需使用逆轉(zhuǎn)錄引物、dNTPs、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及RNA模板。在擴(kuò)增儀或水浴箱中,在規(guī)定的溫度和時(shí)間下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
3、PCR擴(kuò)增反應(yīng)PCR反應(yīng)需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、緩沖液、和適量無RNA/DNA酶超純水、以及模板。在擴(kuò)增儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增。使用二次擴(kuò)增的套式PCR擴(kuò)增方法。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物定性分析;擴(kuò)增產(chǎn)物常用分析方法是瓊脂糖凝膠電泳法,與分子量標(biāo)準(zhǔn)比較,判斷擴(kuò)增片段是否在預(yù)期的分子量范圍內(nèi)。其它擴(kuò)增產(chǎn)物分析方法還有限制性內(nèi)切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等。
5、結(jié)果判定和完成報(bào)告單:每一次檢測(cè)需同時(shí)做兩個(gè)陽(yáng)性對(duì)照、兩個(gè)陰性對(duì)照,只有陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增出預(yù)期的片段、陰性對(duì)照沒有擴(kuò)增出任何片段、雙份平行樣品結(jié)果一致的情況下實(shí)驗(yàn)才成立,可以作出核酸陽(yáng)性或陰性反應(yīng)結(jié)果的判定。
核酸檢測(cè)流程
核酸檢測(cè)常規(guī)的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌版洗液等,權(quán)過程如下:
獲得患者樣本后,需盡快進(jìn)行檢測(cè),如無法立即檢測(cè)需要轉(zhuǎn)運(yùn)的樣本,應(yīng)按照說明書的要求進(jìn)行低溫封裝,并送到專門的檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)機(jī)構(gòu)收到樣本后,對(duì)樣本進(jìn)行核酸提取,核酸提取試劑應(yīng)使用批準(zhǔn)產(chǎn)品說明書中指定的核酸提取試劑盒。
病毒RNA需要首先逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,再進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。PCR擴(kuò)增和檢測(cè)應(yīng)使用批準(zhǔn)產(chǎn)品說明書中指定的熒光定量PCR儀,通過熒光定量PCR所得到的樣本Ct值的大小,可以判斷患者樣本中是否含有新型冠狀病毒。
擴(kuò)展資料:
目前,臨床上核酸檢測(cè)主要是通過咽拭子檢測(cè)方法,流程是先囑被檢查者用淡鹽水漱口,可以將口腔中的雜菌清理掉,然后將標(biāo)簽貼于標(biāo)本容器上。
告知被檢查者取咽拭子培養(yǎng)的目的和方法,點(diǎn)燃酒精燈,囑咐被檢查者張口的,發(fā)啊的音,充分暴露咽喉部,用培養(yǎng)管內(nèi)的消毒長(zhǎng)棉簽以靈敏而輕柔的動(dòng)作擦拭兩側(cè)腭弓和咽扁桃體上的分泌物,取樣完畢后,將試管口在酒精燈火焰上進(jìn)行消毒,然后將棉簽插入試管,塞緊后及時(shí)送檢。
核酸檢測(cè)作為病原診斷的一個(gè)重要依據(jù),是目前確診的最重要依據(jù),比如對(duì)于目前新冠肺炎的檢測(cè),病毒核酸檢測(cè)仍是確診的金標(biāo)準(zhǔn)。
核酸檢測(cè)流程和要求
做核酸檢測(cè)可以檢查出不少病毒,那么核酸檢測(cè)流程和要求有哪些呢?
核酸檢測(cè)流程為標(biāo)本采集、標(biāo)本轉(zhuǎn)送、標(biāo)本簽收及錄入、提取核酸、配制試劑、加樣、上機(jī)檢測(cè)。通常標(biāo)本在緊密包裝下被護(hù)送到實(shí)驗(yàn)室后需求實(shí)驗(yàn)室簽收,錄入信息系統(tǒng)。到達(dá)實(shí)驗(yàn)室時(shí)可以直接用于檢測(cè)的不是樣品,而是需要進(jìn)行預(yù)處理以在擴(kuò)增前從樣品中提取核酸的樣品。
在醫(yī)護(hù)人員取樣做核酸之前,做核酸的地點(diǎn)通常都會(huì)安排相應(yīng)的填寫流程。要做核酸的居民一定要在排隊(duì)的過程中,提前做好相關(guān)內(nèi)容的填寫,以免輪到自己的位次是因?yàn)樾畔⑻顚懖煌暾绊懻麄€(gè)隊(duì)伍的檢測(cè)效率。還有做核酸檢測(cè)的人,得注意壓一壓跳脫的性子。排隊(duì)過程中,盡量保持安靜,也是對(duì)醫(yī)務(wù)人員、基層防疫人員的尊重。
核酸檢測(cè)是什么樣的流程?新冠病毒是怎么被查出來的?
核酸檢測(cè)的流程非常簡(jiǎn)單:1.采集人體分泌物,用棉簽在口腔底部摩擦留下細(xì)胞。2.醫(yī)務(wù)人員留樣,將棉簽保存好。3.樣本保存后,送進(jìn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核酸提取。4.進(jìn)行熒光PCR核酸檢測(cè),將提取物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)。5.獲得報(bào)告,如果檢測(cè)結(jié)果如果是陽(yáng)性,則需要再進(jìn)行復(fù)核檢測(cè)。
新冠病毒主要是通過對(duì)病毒的遺傳物質(zhì)RNA進(jìn)行檢測(cè) ,用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)標(biāo)記物,如果出現(xiàn)了熒光反應(yīng),這說明患者感染了新冠病毒。
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